10×單細(xì)胞全長轉(zhuǎn)錄組測序利用ONT長讀長實(shí)時測序技術(shù)結(jié)合10X技術(shù)可以直接讀取反轉(zhuǎn)錄的全長cDNA,并進(jìn)行快速分析。這樣能夠有效的獲取高質(zhì)量的單個RNA分子的全部序列,準(zhǔn)確辨別二代測序無法識別的同源異構(gòu)體 (isoform)、同源基因、超家族基因或等位基因表達(dá)的轉(zhuǎn)錄本。
Nanopore測序借助分子通過納米孔時引起孔兩側(cè)電位差來實(shí)現(xiàn)信號檢測,而ATCG四種堿基的帶電性質(zhì)不同,因此通過電信號差異特征即可檢測出通過納米孔的堿基類型,從而實(shí)現(xiàn)測序。
細(xì)胞圖譜繪制、生物標(biāo)志物分析、腫瘤異質(zhì)性與耐藥分析、干細(xì)胞分化與潛能研究
(1). 將全血用 PBS 1:1 在錐形管中稀釋;
(2). 在稀釋的樣本上面加入等體積的 Ficoll;
(3). 1000g 離心 20min;
(4). 將位于 PBS 和 Ficoll 層間的 PBMC 轉(zhuǎn)移到一個新的管中;
(5). 加入 PBS 清洗細(xì)胞;
(6). 4℃,300-400g 離心細(xì)胞懸液 4-5min,去除上清液;
(7). 用不含鈣鎂的 1X PBS + 0.04%BSA 緩沖液重懸沉淀細(xì)胞并做計數(shù)和活力分析;
(8). 重復(fù)步驟 6 后,將細(xì)胞用不含鈣鎂的 1X PBS + 0.04%BSA 緩沖液重懸至細(xì)胞濃度為 2×10^7/ml。
Singh M, Al-Eryani G, Carswell S, et al. High-throughput targeted long-read single cell sequencing reveals the clonal and transcriptional landscape of lymphocytes. Nat Commun. 2019;10(1):3120. Published 2019 Jul 16.
查看文獻(xiàn)Kevin Lebrigand, Virginie Magnone,Pascal Barbry,Rainer Waldmann.High throughput, error corrected Nanopore single cell transcriptome sequencing.November 05, 2019
查看文獻(xiàn)| 欧美黑人精品无码久久久 | 成人色情影院第四色色影院 | 精品一区二区三区四区蜜桃 | 鲁鲁狠狠狠7777一区二区 | 成人区人妻精品一熟女 | 国产精品999无码99 | 韩国少妇BBB毛毛片 四川BBB搡BB水多 | 亚州AV 无吗东京热 亚洲一级在线免费观看 | 亚洲AV无码乱码情品国产 | A级高清视频欧美日韩 | 免费极品av一视觉盛宴 | 欧美午夜操逼福利大片 | 91久久无码一区人妻A片蜜桃 | 熟伦小说小视频区 | WWW欧美美女按摩性爱com | 国产精品久久久久久亚洲影视 | 黄色视频在线观看无码 | 国产高潮的无套A片激情视频大全 | 无码国产色欲XXXX视频 | 国产激情久久久久久一级A片老师 | 国产a久久秘 麻豆入口 | 日本强伦轩人妻中文字幕 | 黄色免费在线网站 | 国产精品凹凸777777 | 亚洲精品在线免费 | 亚洲中文字幕乱码免费播放 | 少妇也疯狂毛毛毛毛A片 | 激情婬乱A片吸吸视频 | 成人免费无码婬片在线 | 18 无套直国产 | 特黄做受又粗又大又硬老头视频 | 91精品国产乱码久久久久 | 17c综合国产日本在线 | 成人毛片18女人毛片免费不卡在线 | 欧美性生交XXXXX久久久缅北 | 免费中文字幕在线观看 | 美女裸体秘 奶网站无遮挡 蜜桃av乱码人妻一二三区 | 国产又黄又粗又硬视频 | 亚洲第一视频在线播放 | 丰满老妇高潮一级A片 |