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 分類: 轉(zhuǎn)錄組測(cè)序

在生物學(xué)的研究中,有一個(gè)常用的方法,就是通過比較分析獲取有用的信息和知識(shí)。我們現(xiàn)在最常見的比對(duì)是蛋白質(zhì)序列之間或核酸序列之間的兩兩比對(duì),通過比較兩個(gè)序列之間的相似區(qū)域和保守性位點(diǎn),尋找二者可能的分子進(jìn)化關(guān)系。我們?cè)谶M(jìn)行功能注釋的時(shí)候也是基于序列相似 ? ? 功能相似這樣的一個(gè)原理來進(jìn)行的。

目前BLAST (Basic Local Alignment Search Tool)是現(xiàn)在應(yīng)用最廣泛的序列相似性搜索工具,它運(yùn)用某種特定的數(shù)學(xué)模型或算法,找出兩個(gè)或者是多個(gè)序列之間的最大匹配堿基或氨基酸殘基數(shù),比對(duì)的結(jié)果反映了算法在多大程度上提供序列之間的相似性關(guān)系及它們的生物學(xué)特征。BLAST因其快速及比對(duì)精度高而被廣泛應(yīng)用于雙序列或多序列比對(duì)。

大家非常熟悉的是NCBI上面的BLAST比對(duì),還記得小編讀研期間在師兄的諄諄教誨下學(xué)到的第一個(gè)技能就是BLAST比對(duì),可見它的重要性及廣譜性!因?yàn)榇蠹覍?duì)NCBI上的BLAST非常熟悉,這里我就不做過多的介紹了。今天跟大家分享的是一款可視化的比對(duì)工具:百邁客云(BMKCloud)—BLAST。

序列比對(duì)與NCBI采用的都是第三方BLAST,其數(shù)學(xué)模型或算法都是一樣的。可能大家要問了,既然都一樣,那我為什么要選擇BMKCloud呢?在這里我要隆重介紹介紹,BMKCloud優(yōu)勢(shì)如下:

1、更靈活:可以拿任何fasta文件當(dāng)做比對(duì)的數(shù)據(jù)庫,而NCBI是不支持自定義比對(duì)數(shù)據(jù)庫的,只能用內(nèi)置的數(shù)據(jù)庫做比對(duì);

2、無限制:我們可以比對(duì)很多的序列,而NCBI上是有限制的,超過上限將不能運(yùn)行比對(duì)任務(wù)。

很多時(shí)候我們拿到轉(zhuǎn)錄組的測(cè)序數(shù)據(jù),需要在海量的數(shù)據(jù)里找到自己關(guān)注的基因。我們可以通過關(guān)鍵詞進(jìn)行功能注釋的搜索,還有常見的方法是我們關(guān)注的 基因,可能在別的物種或者是近緣物種已有報(bào)導(dǎo)。針對(duì)這種情況我們就可以通過已知的基因序列運(yùn)用BLAST比對(duì)在我們的測(cè)序數(shù)據(jù)里找同源序列。

那這個(gè)時(shí)候你需要的是什么?

大聲告訴我~~

對(duì),就是百邁客云(BMKCloud)小工具—BLAST!

依然是非常簡(jiǎn)單的操作步驟:

1.登錄百邁客云首頁(www.biocloud.net)——分析——工具

2.在對(duì)話框中輸入“BLAST”,Enter鍵進(jìn)入工具使用界面

3. 這里有幾個(gè)輸入框或勾選框,主要包括:

1、 項(xiàng)目名稱
2、database :用于建庫的核苷酸或氨基酸序列文件,默認(rèn)使用NR庫(FASTA格式)。
3、 infile :用于比對(duì)的序列文件,可以為核酸序列或者氨基酸序列。
4、 expect :非負(fù)數(shù),默認(rèn)的e值為10,E值越小,說明比對(duì)結(jié)果越可信。一般做基因的注釋,與已知數(shù)據(jù)進(jìn)行同源性搜索,通常設(shè)定為1e-5或 更小的值。
5、 qcov :0-100,默認(rèn)為80,查詢序列與目標(biāo)序列的覆蓋率。

其中兩個(gè)必填輸入框

項(xiàng)目名稱:即根據(jù)自己需求對(duì)本次BLAST進(jìn)行命名描述,以便于后期查看結(jié)果與
infile :在輸入比對(duì)的序列文件時(shí),有三種方式,包括選擇云文件、瀏覽本地文件或拖拽文件

另外,之前提到BMKCloud很重要的一個(gè)優(yōu)勢(shì)在于可以拿任何fasta文件當(dāng)做比對(duì)的數(shù)據(jù)庫,因此在“database”這一輸入框中大家就可以選擇自己的轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)作為比對(duì)的參考數(shù)據(jù)庫。

4.完成項(xiàng)目名稱和fasta文件輸入之后,點(diǎn)擊提交即可運(yùn)行比對(duì)任務(wù)。

BMKCloud還有很多既操作簡(jiǎn)單又實(shí)用的小工具,如果你正對(duì)著一組數(shù)據(jù)苦惱的話,那就來BMKCloud了解一下吧,可能會(huì)有很多驚喜發(fā)現(xiàn)??!

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