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核酸提取是各種分子生物學(xué)研究中的一項必要技術(shù),核酸提取的主要步驟包括破碎樣本與核酸釋放、核酸分離與純化、核酸沉淀和洗滌。在進(jìn)行這些繁瑣的提取步驟中,操作不謹(jǐn)慎,會出現(xiàn)核酸(DNA/RNA)濃度低、有雜質(zhì)、核酸降解等問題,影響后續(xù)的實驗進(jìn)行。


離心柱法提取核酸流程圖(圖片來自于網(wǎng)絡(luò))

為了解決以上問題,百邁客生物開發(fā)了一種簡單、快速和高效的動物核酸提取試劑盒。可以從動物組織、細(xì)胞、血漿樣本中快速提取總DNA&RNA,適用于后續(xù)PCR、 DNA文庫構(gòu)建、體外翻譯等各種分子實驗。

Blood/Cell/Tissue DNA Kit
動物DNA提取試劑盒

該試劑盒使用硅膠柱純化方式,含特殊的結(jié)合液/蛋白酶K,能迅速裂解細(xì)胞和滅活細(xì)胞內(nèi)核酸酶;可高效清除細(xì)胞代謝物、蛋白等雜質(zhì)??梢詮膭游锝M織、細(xì)胞、全血樣本中快速提取總DNA。

產(chǎn)品特點

改良配方:含特殊的結(jié)合液/蛋白酶K,能迅速裂解細(xì)胞和滅活細(xì)胞內(nèi)核酸酶;可高效清除細(xì)胞代謝物、蛋白等雜質(zhì)。

特殊純化:使用硅膠柱純化方式,提取過程中無需進(jìn)行耗時的醇類沉淀,并去除RNA、雜蛋白、脂類 及其他抑制性雜質(zhì)。

適用樣本豐富:適用各種血液、動物細(xì)胞、動物組織。

毒性?。禾崛∵^程中無需使用苯酚等有毒試劑。

結(jié)果展示

1.DNA濃度/純度檢測:提取不同動物組織中的DNA,然后檢測DNA的濃度和吸光度。

結(jié)論:Qubit測得的DNA濃度較高;且A260/A280值在1.8~2.5之間,表明提取的DNA純度高。

表1:用Qubit檢測DNA的濃度,以及用Nanodrop檢測DNA在260 nm的吸光度。

2.DNA完整性檢測:提取50?mg不同組織中的DNA,然后凝膠電泳檢測完整性。

結(jié)論:條帶明亮清晰無拖尾現(xiàn)象,表明提取的血液、動物組織、細(xì)胞的DNA完整性好。

圖1:將提取的DNA每孔上樣300 ng,瓊脂糖濃度為1%,70 V電壓,跑膠45 min。
Lane 1:λ-Hind Ⅲ DNA Marker ;Lane 2:雞血;Lane 3:人血;Lane 4:小鼠胃;Lane 5:
大鼠肺;Lane 6:小鼠脾臟;Lane 7:小鼠肝臟;Lane 8:Marker;Lane 9:果蠅;Lane 10:東亞飛蝗;Lane 11:石斑魚;Lane 12:白條地藤壺;Lane 13:λ-Hind Ⅲ DNA Marker。

 

Biomarker Cell/Tissue Total RNA Isolation Kit
動物RNA提取試劑盒

該試劑盒中的裂解液RLT Plus能迅速裂解細(xì)胞和滅活細(xì)胞RNA酶的活性;且基因組清除柱能有效分離上清液并去除gDNA。提取的RNA純度高、質(zhì)量穩(wěn)定。適用于從動物組織、細(xì)胞、樣本中快速提取總RNA。

產(chǎn)品特點

適用樣本豐富:可快速提取動物組織、細(xì)胞、昆蟲等樣本總RNA。高效基因組DNA柱清除技術(shù):可有效清除電泳可見gDNA殘留,提取的總RNA純度高,沒有基因組、蛋白和其它雜質(zhì)的污染。RNA純度高:可用于RT-PCR、qPCR、普通轉(zhuǎn)錄組測序、全長轉(zhuǎn)錄組測序等下游實驗。

結(jié)果展示

1.RNA濃度檢測:Nanodrop檢測A260/A280值在2.0左右,表明提取的RNA純度高,且濃度高。同時Agilent 2100生物分析儀檢測的RIN值接近10,表明RNA無降解,完整性好。


2.RNA完整性檢測:通過凝膠電泳檢測,發(fā)現(xiàn)28S和18S條帶最明亮、清晰、條帶邊緣銳利,且28S條帶的亮度大概是18S條帶的兩倍或者以上,表明提取的RNA的完整性好。

圖2:將提取的RNA每孔上樣200 ng,瓊脂糖濃度為1%,180V電壓,跑膠20 min。
Lane 1:250 bp DNA Marker ;Lane 2:小鼠/子宮;Lane 3:小鼠/肺;Lane 4:小鼠胃;Lane 5:小鼠/心臟;Lane 6:果蠅。

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